紫外可见分光光度计是一种常用的分析仪器,由于使用范围广,频率高,经常出现故障。了解光度计的常见问题及处理方法,有助于及时解决问题,保证实验的顺利进行。
1、关于仪器的预热
一般分光光度计的操作说明中,要求仪器预热时间在20分钟左右;如果是带微处理器的分光光度计,仪器开机后会自动进入自检(初始化)状态,大概需要10分钟。在分光光度计预热的过程中,很多用户或多或少都存在这样的问题,比如只预热电路系统(不调整波长,打开吸收池黑盒盖预热等),或者认为初始化过程是预热等。
对于具有微处理器自检功能的分光光度计,在仪器自检(初始化)开始后,在测量窗口上设置所需的波长值,在吸收池中安装纯化水并放在光路上。调整“0000A”后,将仪器预热,当仪器读数没有变化时,再进行测量。
对于紫外可见分光光度计,由于有两个光源(钨灯和氘灯),为了延长灯的使用寿命,可以在通电自检后关闭测量中不使用的光源灯。
2、波长准确度的检查和校正
日常使用分光光度计的时候有没有经常检查波长准确度?答案是否定的,日常测量中仪器灵敏度下降时,要检查波长准确度。简单的检查方法(粗略检查)是:仪器开启后,将波长调至580nm,在吸收池底座的光通道中插入一张白色卡片纸。如果能观察到矩形黄点,则波长精度在正常范围内,否则应进行波长校正。
当仪器被长距离运输、机械振动或更换灯泡时,必须检查并校正波长准确度。粗略检查同上,其校正方法有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法,使用氘灯的特征发射线校正法。
3、关于吸光度测量的重复性
在紫外可见分光光度计的测定过程中,发现同一溶液在不同的时间有不同的测定结果,即重复性不好。原因是什么?排除测量误差的因素,可能的原因有:
(1)仪器预热时间不足或预热方法不正确,应延长预热时间或采用正确的预热方法。
(2)光电转换器(如光电池)的光电转换效率因长期使用而发生变化。此时标准溶液和待测溶液的吸光度也较低,在相对定量时对结果影响不大。但对于这类仪器,一般建议连续使用时间不要超过3小时。如果需要长时间使用,最好间歇使用30min分钟。